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臨床基因擴增檢驗實驗室裝修

臨床基因擴增檢驗實驗室裝修SICOLAB

一、 臨床基因擴增檢驗實驗室裝修設計方案

(一)臨床基因擴增檢驗實驗室區域設計原則。


原則上臨床基因擴增檢驗實驗室應當設置以下區域:試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增區、擴增產物分析區。這4個區域在物理空間上必須是完全相互獨立的,各區域無論是在空間上還是在使用中,應當始終處于完全的分隔狀態,不能有空氣的直接相通。根據使用儀器的功能,區域可適當合并。例如使用實時熒光PCR儀,擴增區、擴增產物分析區可合并;采用樣本處理、核酸提取及擴增檢測為一體的自動化分析儀,則標本制備區、擴增區、擴增產物分析區可合并。各區的功能是:

1.試劑儲存和準備區:貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備,以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。
2.標本制備區:核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管。對于涉及臨床樣本的操作,應符合生物安全二級實驗室防護設備、個人防護和操作規范的要求。
3.擴增區:cDNA合成、DNA擴增及檢測。

4.擴增產物分析區:擴增片段的進一步分析測定,如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。



(二)臨床基因擴增檢驗實驗室的空氣流向。


臨床基因擴增檢驗實驗室的空氣流向可按照試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區進行,防止擴增產物順空氣氣流進入擴增前的區域。可按照從試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區方向空氣壓力遞減的方式進行。可通過安裝排風扇、負壓排風裝置或其他可行的方式實現。


(三)工作區域儀器設備配置標準


1.試劑儲存和準備區。
(1)2~8℃和-20℃以下冰箱。
(2)混勻器。
(3)微量加樣器(覆蓋0.2-1000μl)。
(4)可移動紫外燈(近工作臺面)。
(5)消耗品:一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭。
(6)專用工作服和工作鞋(套)。
(7)專用辦公用品。
2.標本制備區。

臨床基因擴增檢驗實驗室裝修

2.標本制備區

(1)2-8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱。
(2)高速離心機。
(3)混勻器。
(4)水浴箱或加熱模塊。
(5)微量加樣器(覆蓋0.2-1000μl)。
(6)可移動紫外燈(近工作臺面) 。
(7)生物安全柜。
(8)消耗品:一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾芯)。
(9)專用工作服和工作鞋(套)。
(10)專用辦公用品。
(11)如需處理大分子DNA,應當具有超聲波水浴儀。
3.擴增區

(1)核酸擴增儀。
(2)微量加樣器(覆蓋0.2-1000μl),(視情況定)。
(3)可移動紫外燈(近工作臺面)。
(4)消耗品:一次性手套、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾芯)。
(5)專用工作服和工作鞋。
(6)專用辦公用品。
4.擴增產物分析區
視檢驗方法不同而定,基本配置如下:
(1)微量加樣器(覆蓋0.2-1000μl)。
(2)可移動紫外燈(近工作臺面)。
(3)消耗品:一次性手套、加樣器吸頭(帶濾芯)。
(4)專用工作服和工作鞋。
(5)專用辦公用品。

上述各區域儀器設備配備為基本配備,實驗室應當根據自己使用的擴增檢測技術或試劑的特點,對儀器設備進行必要的增減。


二、臨床基因擴增檢驗實驗室工作基本原則

(一)進入各工作區域應當嚴格按照單一方向進行,即試劑儲存和準備區→標本制備區→擴增區→ 擴增產物分析區。

(二)各工作區域必須有明確的標記,不同工作區域內的設備、物品不得混用。

(三)不同的工作區域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開各工作區域時,不得將工作服帶出。
(四)實驗室的清潔應當按試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區的方向進行。不同的實驗區域應當有其各自的清潔用具以防止交叉污染。
(五)工作結束后,必須立即對工作區進行清潔。工作區的實驗臺表面應當可耐受諸如次氯酸鈉的化學物質的消毒清潔作用。實驗臺表面的紫外照射應當方便有效。由于紫外照射的距離和能量對去污染的效果非常關鍵,因此可使用可移動紫外燈(254nm波長),在工作完成后調至實驗臺上60~90cm內照射。由于擴增產物僅幾百或幾十堿基對(bp),對紫外線損傷不敏感,因此紫外照射擴增片段必須延長照射時間,最好是照射過夜。
(六)實驗室的安全工作制度或安全標準操作程序,所有操作符合《實驗室生物安全通用要求》(GB19489-2008)。
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